1586 gab Osiander seine Sammlung von 50 vierstimmigen Chorälen heraus, die für die künftige Entwicklung des Chorals maßgeblich werden sollte.
Erstmals wurde von ihm die Choralmelodie, die zuvor üblicherweise im Tenor zu finden war, im Sopran geführt. Nach Osianders eigener Vorrede sollte das helfen, dass die Gemeinde den Choral besser mitsingen könne. Zudem stellt die Sammlung eine frühe Kernliedersammlung der Reformation dar, in welcher die 50 wichtigsten Lieder der damaligen Zeit zusammengefasst wurden. Dreißig der Lieder stammen von Martin Luther, immerhin 32 der Lieder finden sich noch heute in den Gesangbüchern. In unserer Neuausgabe der "Fünffzig Lieder und Psalmen" werden sämtliche Lieder neben einer Urtextausgabe auch in der heutigen, oft rhythmisch abgewandelten Version des heutigen Gesangbuches mit allen Liedstrophen wiedergegeben, um die praktische Verwendung zu erleichtern.
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